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無菌室標準化規(guī)程及驗收規(guī)范

更新時間:2016-04-28  |  點擊率:2635

1、無菌室應(yīng)設(shè)有無菌操作間緩沖間,無菌操作間潔凈度應(yīng)達到10000級,室內(nèi)溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超凈臺潔凈度應(yīng)達到100級。
2、無菌室應(yīng)保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。
3、嚴防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。
4、無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
5、無菌室應(yīng)定期用適宜的
消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。
6、需要帶入無菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴密,并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。
7、工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進入無菌室進行操作。
8、無菌室使用前必須打開無菌室的
紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢,應(yīng)及時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。
9、供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。
10、每次操作過程中,均應(yīng)做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。
11、吸取菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
12、接種針每次使用前后,必須通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
13、帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時后取出沖洗。
14、如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時,應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
15、凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)消毒后,才能在水下沖洗,嚴禁污染下水道。
16、無菌室應(yīng)每月檢查
菌落數(shù)。在超凈工作臺開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,證明無菌后,取平板3~5個,分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,10000級潔凈室平均不得超過3個菌落。如超過限度,應(yīng)對無菌室進行*消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。

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